Лаборатория иммунологии отдела лабораторной диагностики

Основная задача лаборатории иммунологии туберкулеза - выявление на ранних стадиях нарушений в функционировании защитной системы организма больного, оценка характера специфического иммунного ответа по степени выраженности гуморального и клеточного ответа на туберкулезный антиген, выявление наиболее значимых отличий в показателях иммунного статуса у больных различными формами туберкулеза и с другой патологией.

Анализ иммунологических показателей проводится с целью:

• дифференциальной диагностики туберкулеза и сходных с ним заболеваний,
• прогноза течения специфического процесса с учетом состояния иммунного статуса больного,
• оценки эффективности проводимой терапии при обследовании в динамике наблюдения,
• иммунологического обоснования включения новых методов иммунотерапии,
• выявления сенсибилизации лимфоцитов к туберкулину.

Только в лаборатории иммунологии НИИФ для выявления более широкого спектра противотуберкулезных антител (ПТАТ) используют комплекс различных серологических реакций. Проводится определение ПТАТ с помощью иммуноферментного анализа, реакции непрямой гемагглютинации (РНГА), потребления комплемента (РПК) и пассивного гемолиза (РПГ) с туберкулиновым антигеном у всех пациентов с подозрением на туберкулез.

Разный вид ПТАТ играет различную патогенетическую роль в течении туберкулеза легких. Преобладание комплементсвязывающих ПТАТ в большинстве случаев указывает на прогрессирующую диссеминацию процесса, гемолизинов – на преимущественно экссудативный характер тканевой реакции, а гемагглютининов – чаще на продуктивный тип воспаления и является одним из важных критериев наличия туберкулезной инфекции у детей. Уровень ПТАТ значительно отличается при прогрессировании специфического процесса и благоприятном течении.

Способ иммунодиагностики различных локализаций туберкулеза, кроме обнаружения ПТАТ в сыворотке крови может включать выявление ПТАТ в биологических жидкостях, максимально приближенных к очагам поражения. Обнаружение ПТАТ в синовиальной жидкости, экстрактах ткани периферических лимфоузлов, перитонеальной жидкости Дугласова пространства, спинномозговой жидкости и бронхоальвеолярных смывах лаважа дает возможность повысить точность диагностики.

Пролиферативный тест или реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) при использовании в качестве митогена – туберкулина (ППД) выявляет степень специфической сенсибилизации лимфоцитов. При противопоказаниях для постановок кожных туберкулиновых проб (RМ 2ТЕ) информацию об интенсивности специфического клеточного ответа можно получить по данным РБТЛ на ППД.

Состояние Т- и В-системы иммунитета исследуется на современном уровне: по содержанию популяций и субпопуляций лимфоцитов при использовании моноклональных антител; потенциальной активности Т-лимфоцитов по выраженности пролиферативного ответа на митоген - фитогемагглютинин; функциональной активности В-системы иммунитета по содержанию иммуноглобулинов.

Неспецифическая резистентность организма оценивается по функциональному состоянию нейтрофильных гранулоцитов, ответственных за процесс фагоцитоза в очаге воспаления, по НСТ-тесту и фагоцитарной активности клеток.

Для более полной оценки состояния иммунокомпетентных клеток и обоснования выбора и назначения иммуномодуляторов нового поколения - рекомбинантных интерлейкинов изучается уровень цитокинов в сыворотке крови и при стимуляции мононуклеаров in vitro туберкулином, фитогемагглютинином.

Проводятся исследования цитокинов в биологических жидкостях (спинномозговой, плевральной и др.).

Результаты определения индуцированной (ППД, ФГА) продукции цитокинов (ИЛ-1b, ИЛ-4, ИЛ-8, ФНО-a, ИЛ-2, ИФН-гамма и др), играющих важную роль в иммунном ответе, дают необходимую информацию для выявления иммунодефицитных состояний при осложненном туберкулезе и иммунологического обоснования выбора и назначения иммунномодуляторов, действующих целенаправленно на дефектные звенья иммунитета.

Научная работа лаборатории иммунологии туберкулеза проходит в тесном контакте с работой клиник института и обобщается в научных статьях и документах для специалистов практического здравоохранения: инструкциях, пособиях для врачей-фтизиатров и научных сотрудников, работающих в области фтизиатрии.

В число проводимых лабораторией исследований входят:

• Определение субпопуляционного состава лимфоцитов крови .
• Определение количества активированных лимфоцитов крови
• Определение функциональной активности лимфоцитов крови (пролиферация лимфоцитов в ответ на фитогемагглютинин).
• Определение специфической сенсибилизации лимфоцитов крови (пролиферация лимфоцитов в ответ на туберкулин).
• Определение функциональной активности нейтрофилов и их поглотительной способности
• Определение концентрации циркулирующих иммунных комплексов
• Определение концентрации иммуноглобулинов A, G, M в сыворотке крови
• Определение концентрации цитокинов (гамма-интерферон, ИЛ-1, ИЛ-4, ФНО-, ИЛ-8, ИЛ-10) в сыворотке крови и культуре клеток.
• Определение уровня продукции противотуберкулезных антител с помощью реакции непрямой гемагглютинации, реакции потребления комплемента, реакции пассивного гемолиза, иммуноферментного анализа и выявления анти-микобактериальных антител IgA,IgG,IgM классов.
• Определение ревматоидного фактора RF.
• Иммуноферментный анализ для определения поверхностного антигена гепатита В, выявления антител к вирусу гепатита С, возбудителю сифилиса, токсоплазмоза, Chlamydia
• Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном.

В лаборатории используется современное оборудование, в том числе проточный цитофлюориметр, а также импортные реактивы и одноразовая посуда.