Лаборатория молекулярно-генетических методов отдела лабораторной диагностики

Руководитель:	к.м.н., доцент Журавлев Вячеслав Юрьевич
Телефон:	(812) 297-66-31
Адрес:	г. Санкт-Петербург, 194064, Политехническая улица, д. 32

Лаборатория молекулярно-генетических методов СПбНИИФ (Политехническая 32, корпус поликлиники 3 этаж, тел. 297-66-31) осуществляет диагностику туберкулеза при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) с регистрацией результатов ПЦР в режиме реального времени (Real-time, прибор iQ iCycler (BioRad) на основе обнаружения в диагностическом материале ДНК микобактерий туберкулезного комплекса.

Стоимость исследования 170 рублей, без стоимости взятия крови непосредственно в лаборатории.

Клинический материал собирается в одноразовые пластиковые пробирки, подписывается маркером (Правила сбора клинического материала смотри в приложении). Пробирки с материалом доставляются в лабораторию до 15.00. кроме пятницы. Направление установленного образца (смотри приложение) заполняется лечащим врачом и доставляется в отдельном пластиковом пакете.

Пробирки можно получить непосредственно в лаборатории и направляются на отделения по запросу.

Чувствительность данного исследования от 65%, специфичность от 90%. Эффективность исследования крови в диагностических целях повышается при диссеминированных процессах и выряженных клинических проявлениях.

Правила взятия и хранения биоматериала для выявления ДНК Микобактерий туберкулезного комплекса (ПЦР-диагностика)

Лаборатория осуществляет обнаружение ДНК микобактерий туберкулезного комплекса в биологическом материале с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР-Real-time PCR).
При доставке материала в лабораторию до 12 часов – результат исследования сообщается лечащему врачу через 24-48 часов. Возможно проведение экстренного исследования.
Пробирки по запросу можно получить в лаборатории. С основной базы материал доставляется транспортом института. Бикс (подписан – лаборатория ПЦР) находится на проходной института.

Материал для исследования:

Мокрота, промывные воды бронхов, смыв с бронхов, смыв из зева, жидкость БАЛ, венозная кровь, плевральный выпот, синовиальная жидкость, цереброспинальная жидкость, соскобы эпителиальных клеток из влагалища, уретры, цервикального канала, секрет предстательной железы, осадок мочи и др.

Выбор клинического материала для анализа должен определяться наиболее вероятным местом локализации возбудителя.

Общие рекомендации по взятию биопроб для ПЦР-анализа:

Взятие материала производится из предполагаемого места специфического поражения.
Взятие биологического материала, По-возможности, должно проводиться в период обострения или выраженной клинической картины. Биологический материал, особенно респираторный и кровь, необходимо собирать до приема химиопрепаратов и антибиотиков, проведения ингаляций и приема пищи. Гинекологический материал для исследования следует брать перед менструацией или через 1-2 дня после ее окончания. Женщины накануне обследования не должны проводить туалет наружных половых органов и спринцевание
Количество материала, забираемого для исследования не должно быть избыточным, т.к. вместе с возбудителем в пробу попадают вещества, которые могут вызывать ингибирование ПЦР или могут способствовать деградации ДНК при хранении и транспортировке. При взятии мазков и соскобов достаточное количество материала - размером “со спичечную головку”. Наиболее адекватным инструментом для взятия соскобов и мазков для ПЦР-анализа является специальный урогентиальный зонд (щеточка), который собирает необходимое количество эпителия, не травмируя слизистую, почти не впитывает образец и хорошо отдает собранный материал в жидкую транспортную среду.
Для взятия биопроб необходимо пользоваться только одноразовым инструментом и одноразовыми пластиковыми контейнерами (или пробирками с транспортной средой) с плотно закрывающейся или завинчивающейся крышкой.

Респираторный материал.

Мокрота - не более 10 мл., смыв с бронхиального дерева, промывные воды бронхов, смыв из зева, жидкость БАЛ собирается в стерильную центрифужную пробирку типа Costar, объемом 50 мл. или одноразовый пластиковый контейнер. Материал хранится при низких положительных температурах до доставки в лабораторию.

Жидкость плеврального выпота – собирается в центрифужную пробирку типа Costar объемом 50 мл. При гнойном характере выпота, высокой степени мутности и высоты отстоя, объем направляемой жидкости (желательно) не более 10 мл.

Особенности взятия материала с задней стенки глотки

Одноразовый зонд вводят за мягкое небо в носоглотку и проводят по задней стенке глотки.

После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при –20°С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

Венозная кровь

Венозная кровь (желательно натощак) до приема противотуберкулезных препаратов и антибиотиков, в количестве от 0,5 до 2,0 мл (в зависимости от типа пробирки) отбирается в стерильную пробирку типа “Эппендорф” соответствующего объема с раствором антикоагулянта (ЭДТА, но только не гепарин!!!). Хранить при температуре +4°С не более 24 часов (не замораживать!). Исследование венозной крови наиболее эффективно при распространенных процессах с выраженной клинической картиной, особенно на пике лихорадки, специфических диссеминациях и полиорганных поражениях.

Особенности взятия материала с конъюнктивы глаз

При наличии обильного гнойного отделяемого его убирают стерильным ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором. Соскоб берут с внутренней поверхности нижнего века движением к внутреннему углу глазной щели. При взятии соскоба необходимо придерживать веко руками, чтобы при моргании ресницы не касались зонда. После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка плотно закрывается. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при –20ºС. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

Особенности взятия материала из влагалища

Материал должен быть взят до проведения мануального исследования. Зеркало перед манипуляцией можно смочить горячей водой, применение антисептиков для обработки зеркала противопоказано. Влагалищное отделяемое собирают стерильным одноразовым зондом из заднего нижнего свода или с патологически измененных участков слизистой и помещают в пробирку с транспортной средой. У девочек взятие материала производят со слизистой оболочки преддверия влагалища, а в отдельных случаях – из заднего свода влагалища через гимениальные кольца. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при –20°С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

Особенности взятия материала из уретры

перед взятием материала пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов;
непосредственно перед взятием материала наружное отверстие уретры необходимо обработать тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором;
при наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать через 15-20 мин после мочеиспускания, при отсутствии выделений необходимо провести массаж уретры с помощью зонда для взятия материала;
у женщин перед введением зонда в уретру проводится ее массаж о лобковое сочленение;
в уретру у женщин зонд вводится на глубину 1,0-1,5 см, у мужчин – на 3-4 см и затем делается несколько вращательных движений; у детей материал для исследования берут только с наружного отверстия уретры;

После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка плотно закрывается. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при –20°С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

Особенности взятия материала из цервикального канала

перед взятием материала необходимо удалить ватным тампоном слизь и затем обработать шейку матки стерильным физиологическим раствором;
зонд вводится в цервикальный канал на глубину 0,5-1,5 см;
при наличии эрозий цервикального канала необходимо их обработать стерильным физиологическим раствором, и материал следует брать на границе здоровой и измененной ткани;
при извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание со стенками влагалища;

Особенности взятия секрета предстательной железы

Перед взятием секрета простаты головка полового члена обрабатывается стерильным ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором. Секрет простаты берется после предварительного массажа простаты через прямую кишку. Врач проводит массаж с надавливанием несколькими энергичными движениями от основания к верхушке. Затем из кавернозной части выдавливается простатический секрет. Образец помещается в одноразовую сухую пластиковую пробирку с плотно закрывающейся или завинчивающейся крышкой и передается в лабораторию. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике.

Особенности взятия (сбора) мочи

Мочу собирают утром натощак после сна или не ранее чем через 2-3 часа после последнего мочеиспускания. Утренняя моча отстаивается в течение 1 часа при комнатной температуре, затем осторожно сливается, оставляя только придонную часть – около 20 мл. Образец мочи (20 мл придонной части) поместить в плотно закрывающийся сосуд и доставить в лабораторию в течение 1-3 часов. Мочу нельзя охлаждать или замораживать (длительному хранению не подлежит).

В направлении установленного образца разборчивым почерком заполняются все графы (ФИО пациента полностью, возраст, номер истории болезни, отделение, адрес, диспансер наблюдения, диагноз согласно классификации, фамилия лечащего врача).

Распечатать направление